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cck-8试剂盒制作标准曲线步骤

发布时间:2021-05-25浏览:82次
   cck-8试剂盒可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。原理为:该试剂中的WST-8与MTT类似,在电子载体1-甲氧基PMS的作用下,被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲臜染料,甲臜的生成量与活细胞的数量和活力成正比,因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。
  cck-8试剂盒优点:
  1、对细胞毒性小;
  2、检测快速;
  3、灵敏度高,甚至可以测定较低细胞密度;
  4、此溶液,毋需预制,即开即用;
  5、重复性优于MTT法;
  6、使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂。
  cck-8试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅一管已经配制好的含有CCK-8溶液,无须再进行任何配制等操作。无须使用同位素,所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞,不必收集细胞,也不必采用额外的步骤去溶解。可以用于大批量样品的检测。酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。对细胞无明显毒性。加入溶液显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读板,使检测时间更加灵活,便于找到最佳测定时间。
  cck-8试剂盒制作标准曲线步骤:
  先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做四个左右细胞浓度梯度,每组五个复孔。接种后培养细胞贴壁,然后加CCK-8试剂培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标,OD值为纵坐标的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量。