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酶联免疫试剂盒酶标板和抗体保护液的优化方法

发布时间:2021-07-05浏览:100次
  酶联免疫试剂盒吸附试验:是酶免疫测定技术中应用广泛的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的方法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,后者用于测定特异抗体。
  完整的酶联免疫试剂盒包含的各个组分是:
  1、已包被抗原或抗体的固相载体;
  2、酶标记的抗原或抗体;
  3、酶的底物;
  4、阴性对照品和阳性对照品定性测定中,参考标准品和控制血清定量测定中;
  5、结合物及标本的稀释液;
  6、洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
  7、酶反应终止液,常用的HRP反应终止液为硫酸,其浓度按加量及比色液的终体积而异。
  酶联免疫试剂盒酶标板和抗体保护液的优化方法:
  酶标板保护液的优化:在封闭完后加入保护液于四度冰箱中孵育放置一个晚上,同时与未做保护的酶标板进行对照,然后将保护的及未保护的酶标板置于三十七度烘箱中放置半个月,考察保护液对酶标板的稳定性的影响。
  酶标抗体保护液的优化:适当的缓冲液以及添加无关蛋白质、糖、防腐剂以及一些含氨基的化合物等都会对对酶标抗体的活性起一定的保护作用,设计了一组保护剂用于保护酶标抗体,与未添加任何糖蛋白的酶标抗体做对照。
 

酶联免疫试剂盒