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人白介素6elisa试剂盒制备操作步骤

发布时间:2021-10-08浏览:130次
   人白介素6elisa试剂盒中的白介素是种多效细胞因子。通过调节免疫和炎症反应在宿主防御中发挥重要作用。IL-6主要由巨噬细胞、 T淋巴细胞、B淋巴细胞产生,在机体发生炎症反应或感染时,病毒、内毒素、肿瘤坏死因子等多种细胞因子可诱导机体产生IL-6。IL-6生物学作用主要体现在诱导8细胞分化产生免疫球蛋白,促进T细胞增殖生长,增强血细胞的分化及其抗瘤效应,促进骨髓造血干细胞增殖等。
  人白介素6elisa试剂盒制备操作步骤:
  1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过*。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。
  2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
  3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
  4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
  5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
  6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

人白介素6elisa试剂盒